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激光共聚焦显微镜

发布日期:2025-11-25 浏览量:

Laser Scanning Confocal Microscope

生产厂商:Zeiss

仪器型号:LSM980

仪器简介

LSM 980 四维共聚焦成像平台,专为光谱拆分特别优化,配有6个固体激发器,可以同时检测多色荧光标记,实现蓝绿、绿红、红及近红外等多通道成像。运用了Airyscan 2技术,可以实现低光毒性的超分辨率成像。通过使用灵活的 Multiplex 模式,只需比以前更短的图像采集时间,就能捕捉更大的观察视野或动态过程。除此之外,还可以使用 Airyscan 联合去卷积(jDCV)进一步提高分辨率,从而识别新的结构。充分利用由 32 通道面阵列检测器Airyscan 提供的额外信息,探索活体样品的潜在分子动力学特征。ZEN 软件可根据指令提供大量帮助,以在超短时间内实现可重复的结果。

主要技术参数

1.激光器包括:固体激光器 405nm,功率30mW;固体激光器 488nm:功率 30mW;固体激光器 514nm,功率 30mW;固体激光器 543nm,功率 30mW;固体激光器 594nm,功率 8mW;固体激光器 639nm,功率 25mW。寿命≥10000h,激光器最小调节精度 0.001%

2.共聚焦扫描检测单元与显微镜一体化设计。扫描振镜数量 2 个。扫描头具有≥85%的成像占比时间。扫描头绝对线性扫描运动。扫描方式有 xy xyz xyt xyzt xz xt xzt spot-tx xy xyz xyt xyzt xz xt xzt,直线扫描,曲线扫描,面扫描。扫描分辨率: 8192× 8192,及16 位灰度级(65536 个灰度级)。扫描光学变倍:最小扫描变倍0.6x,且变倍连续可调。扫描振镜旋转角度360°,同时调节精度0.1 度。独立的 405 激光校正, 保证其与其他激光在 XYZ 精确吻合。GaAsP 荧光检测器4 个, PMT 检测器2 个,透射光检测器(T-PMT检测器)1个。线性分光,光谱范围390-700nm。荧光光谱分辨率精度:3nm

3.超高分辨率成像方法:阵列检测、 PALM SIM STED STORM中任意一种以硬件方式实现的超高分辨率成像方式。超高分辨率检测器采用由32 GaAsP(磷酸砷化镓)组成的高灵敏度面阵列检测器。超高分辨率多通道成像:可以实现蓝绿、绿红、红及近红外等多通道成像;其中蓝绿、绿红、红及近红外等双通道成像无需切换荧光滤片,只需切换激光,实现高速双通道成像。在一个实验中可实现蓝、绿、红、近红外等4 种颜色超高分辨率成像。在确保高荧光收集效率情况下(针孔≥1AU,即不缩小针孔或使用面阵成像时), 超高分辨成像同时满足:分辨率 XY方向120nmZ方向350nm。超高分辨率成像具有与共聚焦相同的超高分辨率成像深度。

4.显微镜主机为倒置荧光显微镜,齐焦距离45mm,最小步进10nm。配置全电动扫描台,行程130mm× 100mm,最大速度50mm/s。显微镜透射光源: 12V100W 卤素灯,根据所用物镜,光源自动匹配适当亮度。荧光附件有复消色差荧光光路,LED 荧光光源(寿命20000h),六位电动滤色镜转盘,含深红、红、绿、蓝激发滤色镜组件。电动聚光镜,NA 0.55,工作距离 26mm。全套微分干涉部件,有与不同数值孔径的物镜一一对应的棱镜。全复消色差物镜:5 倍物镜,数值孔径0.15, 同时满足工作距离12mm;10 DIC 物镜, 数值孔径 0.45, 同时满足工作距离 2mm20 DIC 物镜, 数值孔径0.8, 同时满足工作距离 0.55mm40 DIC 物镜( 带校正环) , 数值孔径0.95, 同时满足工作距离0.25mm63 DIC 物镜,数值孔径1.4,油镜, 同时满足工作距离0.19mm。可以通过显微镜机身的电子触控屏系统控制显微镜并显示工作状态。

5.软件具有智能化光路设置、时间序列模块、光谱扫描及拆分功能、景深扩展模块、共定位分析模块、图像反卷积处理功能、同步数据处理模块、 图像分析功能、图像与视频导入/导出、裁剪功能、参数再调用功能、自动聚焦模块、 三维采集模块、Z 轴深度补偿功能、多位点及大视野拼图模块、动态聚焦地图功能、高动态范围成像、交互式漂白、图像分析模块、细胞计数、三维图像处理、三维图像分模块功能提供原厂的离线图像处理软件:用于查看该设备拍摄的显微图像,调节对比度,对图像添加标尺及标注;可进行常见的文件格式的数据导入/导出(如:JPEG, BMP, TIFF, BigTIFF, PNG, WDP, SUR, AVI, WMF, MOV, OME-TIF, ZVI 等);具有1种二维图像去模糊功能,可利用二维去模糊算法进行图像质量优化;可对 3D 数据进行3D 渲染并导出 3D 渲染视频;可实现 2D 数据关联;可展示正交图像,展示 XY/YZ/XZ 的任一切面层,并创建任一切面层图像;具有交互测量工具,可自定义测量参数,形成测量工作流,可对轮廓、曲线、面积、灰度等值进行测量。

应用领域

激光共聚焦显微镜常用于获取清晰的高质量的以及超高分辨率的共聚焦荧光图像,可用于观测固定细胞,活细胞,动植物组织的深层结构,实现亚细胞成像及定位,细胞功能等,能够长时间的观测和记录细胞骨架蛋白、细胞动力特性、细胞信号转导、囊泡运输、钙火花、光活化、蛋白表达分析、胞内离子信号传输、荧光共定位、单点漂白、荧光共振能量转移等应用。并且能够提供荧光定量统计、比较等功能,对标本的各层光学切片经计算机图像处理及三维重建软件,可以得到其三维立体结构,从而进行各侧面直观的形态学观察。

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